1. 肿瘤浸润淋巴细胞

　　肿瘤浸润淋巴细胞(Tumor Infiltrating Lymphocyte, TIL)是从手术切除的肿瘤组织或转移的淋巴结中分离的淋巴细胞，经细胞因子(如白细胞介素2)诱导活化，经大量扩增后回输给病人。

　　2. TIL的分离与培养

　　临床应用需获得足够的TIL细胞，这取决于实际浸润TIL细胞的数量及分离、扩增TIL方法。临床应用的TIL细胞主要来源于手术切除或活检所得的瘤体组织、癌性胸水、腹水中淋巴细胞及转移淋巴结。目前国内外实验室分离培养TIL方法可获得较理想的TIL群体。

　　3. 国内外应用TIL治疗黑色素瘤的临床研究

　　过继细胞治疗的优点决定了它在肿瘤生物治疗中的地位，已有的临床研究也大都提示其具有良好的应用前景。

　　年Rosenberg等首次应用TIL静脉回输并联合IL -2、环磷酰胺治疗20例恶性黑色素瘤，其中12例达到部分或完全消退。年Steven A Rosenberg总结了NCI从年至年治疗的86例晚期黑色素瘤患者，总有效率(%CR+PR)为34 %(表1)。详见Journal of the National Cancer I
titute, Vol. 86, No. 15, August 3,

　　近来的动物实验提示在过继细胞治疗前清除宿主的内源性淋巴细胞(包括调节性T细胞)对治疗的成功与否至关重要。美国NCI外科部先采用环磷酰胺联合氟达拉滨清除体内免疫细胞，然后将体外扩增的患者自身TIL回输进行过继细胞治疗。结果显示，对于其他疗法已无效的黑色素瘤患者采用上述治疗获得了51.4%的缓解率(8.6%CR+ 42.8%PR)，且平均缓解期达11.5±2.2个月，包括脑部在内的脏器均对治疗出现了反应(图1-3)。另外，Richard Morgan等还通过用体外给患者外周血T淋巴细胞转导某种肿瘤抗原特异性的TCR的方法制备肿瘤特异性的T细胞，然后将转导了TCR的T细胞大量扩增后回输给患者。结果显示，15例转移性黑色素瘤病人治疗后有2例获得了PR，缓解期分别达到了20和21个月。这一效应细胞制备策略为拓展过继细胞治疗的应用范围提供了全新的思路。

　　图1. 55岁男性黑色素瘤患者伴腋下及脑转移经TIL治疗1个月后病灶开始消退，3个月获得完全缓解。

　　Chapter 70: Cancer Immunotherapy Cancer: Principles & Practice of Oncology, 8th Edition -Devita, Hellman & Rosenberg's

　　图2. 45岁男性黑色素瘤患者伴多发肝转移，经TIL治疗后获得完全缓解，缓解期超过4 年。

　　图3. 30岁男性黑色素瘤患者伴皮下转移，经

　　TIL治疗2周内转移灶开始消退，并获得完全缓解且完全缓解期超过2年。

　　Chapter 70: Cancer Immunotherapy Cancer: Principles & Practice of Oncology, 8th Edition -Devita, Hellman & Rosenberg's

　　最新的一项研究中，Steven Rosenberg等采用化疗联合全身照射(Total Body Irradiation, TBI)的方法彻底清除患者体内的免疫细胞后将体外扩增的TIL回输。结果显示，化疗+TIL治疗组43例黑色素瘤患者有效率为49%;化疗+2Gy TBI+过继治疗组25例患者有效率为52%;化疗+12Gy TBI+过继治疗组25例患者有效率为72%(表1)。

　　表1 转移性黑色素瘤患者过继免疫治疗

　　治疗病例数有效率 (n(%))

　　PRCROR

　　No TBI(39.5)4(9.3)21(48.8)

　　2 Gy TBI(44.0)2(8.0)13(52.0)

　　12 Gy TBI(56.0)4(16.0)18(72)

　　注：所有患者均接受化疗和ACT其中化疗方案为环磷酰胺60 mg/kg 2天;氟达拉滨25mg/m2 5天。CR, 完全缓解; OR, 总有效率; PR, 部分缓解。

　　Steven A. Rosenberg Nature Reviews Cancer volume 8 April

　　我科采用DC-CIK过继治疗来替代大剂量化疗从而达到改善患者免疫状况的目的。DC-CIK、TIL序贯治疗后患者一般状况显著改善，肺部转移灶消失，肝转移灶缩小;免疫功能监测结果显示，DC-CIK治疗后患者免疫功能明显改善。见图4、5、6。

　　Day 0

　　采血

　　Day 13手术

　　Day 36

　　TIL回输

　　Day 14、15

　　DC-CIK回输