诊断是否为灰指甲时，取甲表面、甲下碎屑、甲组织进行真菌镜检常可发现真菌菌丝和孢子，可以协助诊断，但不能确定致病菌种;将上述组织置于培养基进行培养，经过2-4周，可分离出致病真菌，这样有利于制定治疗方案。病理检查发现菌丝和孢子时可确诊，为诊断甲真菌病的金标准，注意病理检查时同时做真菌培养。下面我们来看看关于“诊断灰指甲要做哪些检查”的相关介绍。

　　一、真菌的分离与鉴定

　　真菌的分离与鉴定是对真菌进行分离培养然后根据菌落的特征和镜下形态，结构以确定菌种。必要时通过生化反应、鉴别试验、动物接种等方法，以明确菌种。严格无菌操作，避免污染，在培养期间，如发现污染菌生长，应立即转种。接种后的第二天开始逐日观察，并记录生长情况。培养阳性可确立诊断。阴性者需培养3周方可发报告。检查过程如下：

　　1.分离培养

　　(1)试管法：用无菌操作的方法，将采集的标本接种于葡萄糖蛋白琼脂(SDA)培养基斜面上，每个斜面接种3～4处，轻轻划破，置22～25℃温箱连续培养1～3周，做好观察记录。

　　(2)小培养：先备好无菌玻璃平皿内有弯曲玻棒和载玻片，用无菌小刀将SDA培养基切成1cm2方块，放入无菌平皿内的载玻片中央，接种菌种后，取一片无菌盖玻片放在接种好的方块琼脂基上，平皿内放上无菌潮湿棉球，放入22～25℃温箱，待有生长后，取出盖玻片，并反覆在玻片上，乳酸棉蓝染色镜下观察。

　　2.菌种鉴定

　　根据菌种的形态、大小、结构、边缘、颜色、生长速度、表面性质、下沉现象及镜下的形态，确定菌种必要时，用鉴别培养基、生化试验等方法进行鉴定。

　　二、真菌培养检查

　　真菌培养检查是对真菌进行培养并对真菌的菌属进行鉴定，进而对真菌感染引起的疾病进行针对性的治疗的方法。检查前禁忌要注意个人卫生，避免吃对皮肤有强烈刺激性的食物。检查过程如下：

　　1.采集标本：体表真菌的标本有毛发、皮屑、甲屑、痂等，标本在分离前常先用75%的乙醇消毒。深部真菌的标本可根据情况取痰、尿液、粪便、脓液、口腔或阴道分泌物、血液、脑脊液、各种穿刺液和活检组织，采集标本应注意无菌操作。

　　2.培养检查：可提高真菌检出率，并能确定菌种。标本接种于葡萄糖蛋白胨琼脂培养基上，置室温或37℃培养1～3周。必要时可行小培养协助鉴定。菌种鉴定常根据菌落的形态及显微镜下形态判断。对某些真菌，有时尚需配合其他鉴别培养基、生化反应、分子生物学方法确定。

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